Synthesis acidi nucleici exercetur utens solido phase sialic amide triglyceride methodo, qua 3′ finis DNA immobilitat substrato solido phase et nucleotides in 3′ ad 5′ partem accedunt donec desideratum DNA fragmentum perstringitur. .Hoc differt a synthesi DNA per applicationem DNA polymerase.
Finis primae basis in CPG immobilitat in synthesi, 5′-OH basis proximae tritylo DMT di-p-tolyl munitur, amino globus in basi munitur cum acido benzoico et 3′. -OH tunc reducitur cum composito phosphate amino.1 basis 5 5′-OH basis 1 et 3′-OH basis proximae triglyceride formant phosphitam, quae tum cum iodi phosphate triglyceride oxidista est, tutela in basi secunda 5′-OH amovetur. addito acido dichloroacetico cyclo DM per additionem basis proximae, et post synthesim tutelaris in 5′-OH cum acido debili removetur fragmentum resinae solidae cum hydroxide ammonium concentrata disiungitur, tutela removetur a basi. cum hydroxide coacta Ammonium calefactum, sublato ammonium hydroxide, fragmentum vacuum exsiccata est, et acidum nucleicum puro chromatographia liquida vel PAGE.
Gradus Oligo Synthesis
Deblocking
The5 finis DMT coetus tutelaris removetur addita solutione TCA.
Activation
Miscens activatorem cum monomero oligonucleotide ad formam activum oligonucleotidis monomerorum intermedium.
Copulatio
Coetus hydroxylis 5-terminalis cum media oligonucleotide activa reagit in reactionem anti-generativam condensationem ad formandum vinculi triglyceride phosphitae instabilis.
Capping
Additio agentis capping actionem acetylationem capping reactionem cum excessibus gregum hydroxylorum quae in condensatione reactionis non implicantur, efficit.
Oxidation
Additio solutionis iodini continens aquam reagit cum vinculis phosphite inconstans per oxidationem ad formandum vincula acidum phosphoricum triglyceride firmum.
Cyanoethyl synthesis
Acidum nucleicum productum post synthesim, cum solutione DEA addita, ut coetus cyanoethyl removeat e vinculo triglyceride phosphate.
Adhæsit & Deprotection
Acidi nucleici fragmenta e solido periodo ferebat, addita solutione hydroxidi concentrata ammonium ac deinde calefacta, ut coetus protegendi a vinculis hydrogenii bases removerent.
Post tempus: Nov-21-2022